細(xì)胞培養(yǎng)板作為培養(yǎng)細(xì)胞的一種常用和重要的工具,形狀、規(guī)格、用途多樣,你是否也為如何選擇適合的培養(yǎng)板而迷茫?你是否正為如何方便、正確的使用培養(yǎng)板而苦惱?你對(duì)如何處理培養(yǎng)板是否也有困惑?對(duì)不同的培養(yǎng)板各有什么妙用你又有何體會(huì)?
細(xì)胞培養(yǎng)板依底部形狀的不同可分為平底和圓底(U 型和V 型);培養(yǎng)孔的孔數(shù)有 6、12、24、48、96、384、1536 孔等;根據(jù)材質(zhì)的不同有 Terasaki 板和普通細(xì)胞培養(yǎng)板。具體選擇時(shí)根據(jù)培養(yǎng)細(xì)胞的類型、所需培養(yǎng)體積及不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康亩ā?/span>
平底和圓底(U型和V型)培養(yǎng)板的區(qū)別和選擇
不同形狀的板子自然有不同用途。平底的什么類型的細(xì)胞都可用,但當(dāng)細(xì)胞數(shù)目較少,如做克隆時(shí),就用 96 孔平底板;另外,做 MTT 等實(shí)驗(yàn)時(shí),無(wú)論貼壁和懸浮細(xì)胞,一般均用平底板。這樣便于鏡下觀測(cè)、有明確的底面積、細(xì)胞培養(yǎng)液面高度相對(duì)一致,還便于 MTT 檢測(cè)。
至于 U 或 V 型板,一般在某些特殊要求時(shí)才使用。如在免疫學(xué)方面,當(dāng)做兩種不同淋巴細(xì)胞混合培養(yǎng)時(shí),需要二者相互接觸以刺激。因此,一般需要 U 型板,因細(xì)胞會(huì)由于重力的作用而聚集在一個(gè)很小的范圍內(nèi)。V 型板的用途更少,一般用于細(xì)胞殺傷實(shí)驗(yàn)時(shí),為了使效靶細(xì)胞緊密接觸,常使用 V 型板,但這種實(shí)驗(yàn)也可用 U 型板替代(加入細(xì)胞后﹐低速離心)。除此之外,圓底還可以拿來(lái)做分析、化學(xué)反應(yīng)、同位素?fù)饺氲膶?shí)驗(yàn)或是保存樣品用。
孔數(shù)的選擇
流式一般用 6 孔,MTT 一般用 96 孔,細(xì)胞爬片一般用 24 孔等,要具體根據(jù)你的實(shí)驗(yàn)來(lái)定。
Terasaki 板和普通細(xì)胞培養(yǎng)板的區(qū)別
Terasakiplate 主要是用于晶體學(xué)研究,產(chǎn)品設(shè)計(jì)便于對(duì)晶體的觀察與結(jié)構(gòu)分析。有 sitting 和 handing drop 兩種方法。兩種方法應(yīng)用產(chǎn)品的外形結(jié)構(gòu)也不同,材料上選擇 crystal class polymer,特殊的材料有利觀察晶體結(jié)構(gòu)。
細(xì)胞培養(yǎng)板主要材料是 treated sufface,便于細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)與伸展。當(dāng)然還與浮游細(xì)胞的生長(zhǎng)材料,降低結(jié)合表面積有關(guān),取決于實(shí)驗(yàn)材料上的應(yīng)用與對(duì)材料的選擇。
細(xì)胞培養(yǎng)板與酶標(biāo)板的區(qū)別
用多孔細(xì)胞培養(yǎng)板測(cè)吸光度肯定可以,可以用它來(lái)做樣品的蛋白定量和 MTT 檢測(cè)。
區(qū)別:酶標(biāo)板一般要比細(xì)胞培養(yǎng)板貴,細(xì)胞板主要做細(xì)胞培養(yǎng),但也可以用來(lái)測(cè)蛋白濃度;酶標(biāo)板包括包被板和反應(yīng)板,一般不能用做細(xì)胞培養(yǎng),它主要做免疫酶聯(lián)反應(yīng)后的蛋白檢測(cè),它需要更高的要求還需要特定的酶標(biāo)工作液。
常用不同培養(yǎng)板的孔底面積及推薦加液量
不同孔板所加培養(yǎng)液的液面都不宜太深,一般在 2-3 mm 范圍,結(jié)合不同孔的底面積就可算出各培養(yǎng)孔的適宜加液量。若加液量過(guò)多會(huì)影響氣體(氧氣)交換,而且在搬動(dòng)過(guò)程中易溢出造成污染。具體所加細(xì)胞密度依實(shí)驗(yàn)的目的不同靈活掌握。
培養(yǎng)器皿 | 面積(cm2) | 培養(yǎng)液量(ml) | 細(xì)胞量 |
96 孔培養(yǎng)板 | 0.32 | 0.1 | 105 |
24 孔培養(yǎng)板 | 2 | 1.0 | 5×105 |
12 孔培養(yǎng)板 | 4.5 | 2.0 | 106 |
6 孔培養(yǎng)板 | 9.6 | 2.5 | 2.5×106 |
3.5 cm 培養(yǎng)皿 | 8 | 3.0 | 2×106 |
6 cm 培養(yǎng)皿 | 21 | 5.0 | 5.2×106 |
10 cm 培養(yǎng)皿 | 55 | 10.0 | 13.7×106 |
25 cm2 培養(yǎng)瓶 | 25 | 5.0 | 5×106 |
75 cm2 培養(yǎng)瓶 | 75 | 15~30 | 2×107 |