BI胎牛血清組份的復(fù)雜性及作用機(jī)理的關(guān)聯(lián)性，使得人工無(wú)血清培養(yǎng)基添加物想要模擬胎牛血清組份的作用就難上加難了。但隨著細(xì)胞生物學(xué)及發(fā)酵制藥工業(yè)的發(fā)展，成本及潔凈程度的要求下，勢(shì)必會(huì)有新的人工替代試劑出現(xiàn)，而這需要我們科研人員的共同努力。
BI胎牛血清使用中遇到的常見(jiàn)問(wèn)題總結(jié)：
問(wèn)：加到培養(yǎng)基中的BI牛血清必須滅活嗎？
答：不是必須的，看做什么實(shí)驗(yàn)了。
問(wèn)：BI胎牛血清(Bioind胎牛血清)滅活是56℃ 30分鐘嗎？
答：如果用于培養(yǎng)大多數(shù)的腫瘤細(xì)胞，血清一般是不需要滅活的，這樣可以有效保存血清中的生長(zhǎng)因子。 但是如果用于培養(yǎng)一些表面具有補(bǔ)體受體的細(xì)胞，如內(nèi)皮細(xì)胞，血清是需要滅活，一般是56℃，30min。
問(wèn)：我要做滋養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)，胎牛血清要滅活嗎？
答：進(jìn)口的一般都已滅活，國(guó)產(chǎn)的不一定，還是滅活一下再用較安全。
問(wèn)：我用病毒上清轉(zhuǎn)染細(xì)胞，培養(yǎng)用的血清需要滅活嗎？因?yàn)檠逯锌赡苡行┭a(bǔ)體和抗體，是不是會(huì)影 響轉(zhuǎn)染？我想未滅活的血清中含些抗體補(bǔ)體可能會(huì)和病毒相結(jié)合，影響轉(zhuǎn)染，正確嗎？細(xì)胞是單核細(xì)胞白血病細(xì)胞， 病毒是病毒包裝細(xì)胞PT67收集的病毒上清。為什么要用無(wú)血清培養(yǎng)基加病毒孵育幾小時(shí)，目的是什么？
答：血清一定要滅活，可以先用無(wú)血清培養(yǎng)基加病毒孵育幾小時(shí)以后再加血清。避免雜蛋白對(duì)病毒和宿主 結(jié)合過(guò)程的干擾，一般是2-6小時(shí)，根據(jù)細(xì)胞的狀態(tài)決定。血清不一定需要滅活，滅活的目的是將血清中的補(bǔ)體滅活 ！這要根據(jù)實(shí)際情況而定，如果沒(méi)有把握那就滅活吧，也不麻煩56度半個(gè)小時(shí)。
問(wèn)：(1)我買的是BI胎牛血清，要滅活嗎？有些說(shuō)法是需要，有些說(shuō)直接解凍后就可以加入到培 養(yǎng)基中；我配制胰蛋白酶液，用的是D-PBS，有關(guān)系嗎？
答：關(guān)于BI胎牛血清的熱滅活，是很多人感興趣也存在一定爭(zhēng)議的話題。大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室將血清的熱滅活還是作為 常規(guī)來(lái)執(zhí)行，因?yàn)橛袃蓚€(gè)作用，第一是滅活補(bǔ)體，第二是滅活血清中可能存在的支原體。但是實(shí)驗(yàn)者并沒(méi)有考慮熱處 理對(duì)血清中的生長(zhǎng)因子 氨基酸等成分帶來(lái)的負(fù)面影響。
