關(guān)于氯化血紅素檢測(cè)方法的文章及報(bào)道主要有紫外光譜法、熒光法、紅外光譜法、極譜法、可見光分光光度法、電極法等。
兩種光譜法原理類似，均是利用標(biāo)準(zhǔn)品與樣品的紅外光掃描譜圖和紫外光掃描譜圖進(jìn)行比對(duì)，對(duì)圖譜的走向以及變化趨勢(shì)進(jìn)行比較。在紅外光掃描譜圖中，如果樣品與標(biāo)準(zhǔn)品具有相同的吸收特征，掃描譜圖形狀大體一致，可以以此說明試驗(yàn)所得樣品為氯化血紅素。在紫外光掃描譜圖中，標(biāo)準(zhǔn)品在波長(zhǎng)為 380-410nm 范圍內(nèi)有最大吸收，但是因?yàn)槿軇┑牟煌?，?huì)導(dǎo)致標(biāo)準(zhǔn)品的最大吸收波長(zhǎng)也不同。在相同實(shí)驗(yàn)條件下，如果樣品在同一波長(zhǎng)處具有最大吸收，該方法可作為氯化血紅素的定性鑒定。袁曦對(duì)氯化血紅素口服液采用紫外光譜法對(duì)其氯化血紅素含量進(jìn)行檢測(cè)，采用波長(zhǎng)為384nm 處對(duì)抗貧口服中的氯化血紅素進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果表明在1.80-9.10ug/mL 線性范圍內(nèi)，R=0.9999，標(biāo)準(zhǔn)差是 0.67%，方法的平均回收率達(dá)到99.3%。
熒光法是利用血紅素中卟啉的熒光特性，利用熒光光度計(jì)可檢測(cè)出樣本的熒光強(qiáng)度，從而計(jì)算其相應(yīng)的血紅素含量，如糞便中血紅素的定量測(cè)定，血紅蛋白在腸道中消解為血紅素，血紅素在腸道內(nèi)細(xì)菌的作用下，大部分被消解為卟啉，利用卟啉的熒光特性，可計(jì)算其相應(yīng)的血紅素含量。血紅素與草酸試劑共熱能脫去亞鐵離子，并被還原成具有熒光特性的卟啉，此條件下利用熒光法所測(cè)得的卟啉為腸道中全部的血紅素量。消解的血紅素除以血紅素總量即為血紅素腸道轉(zhuǎn)換率，由于出血部位越高，被消化吸收的時(shí)候越長(zhǎng)，腸道的轉(zhuǎn)換率也越高，所以從腸道轉(zhuǎn)換率可以大概推算出腸道出血的部位。
將血紅素溶解于 0.25%Na2CO3溶液中，在波長(zhǎng)為 610nm 處有最大吸收峰值，楊淑琴在血紅素的鹽酸丙酮法提取工藝中有用該法對(duì)血紅素的含量作了測(cè)定。
通過研究血紅素的極譜行為，以0.1mol/L NH3-NHCl 作為緩沖溶液，血紅素在-0.42V點(diǎn)出現(xiàn)一個(gè)靈敏的陰極波。利用該方法可檢測(cè)出zuidi血紅素濃度為8×10mol/L。
該法采用修飾后的石墨電極檢測(cè)血紅素，發(fā)現(xiàn)電極對(duì)血紅素的濃度反應(yīng)比較靈敏，濃度在 1×10～1×10mol/L范圍內(nèi)血紅素與電極反應(yīng)成線性關(guān)系。
除了上面的方法外，還有一些關(guān)于測(cè)定氯化血紅素的方法。袁曦在水浴加熱加熱條件下利用氫氧化鈉溶液將氯化血紅素溶解，冷卻后加入硫酸，晃勻后立即產(chǎn)生棕色沉淀。過濾后取濾液加硫氰酸銨試液數(shù)滴，溶液呈棕紅色。此顯色反應(yīng)可用作氯化血紅素的定性檢測(cè)。
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