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PBS緩沖液可以幫助維持實驗中的PH值、離子強度和溫度等參數(shù)
  • 發(fā)布日期:2023-03-16      瀏覽次數(shù):961
    •   PBS緩沖液是生物學(xué)和化學(xué)實驗中常用的一種緩沖液,它可以幫助維持生物學(xué)實驗中的PH值、離子強度和溫度等參數(shù),保證實驗的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。下面我們將詳細(xì)介紹PBS緩沖液的定義、成分、用途以及制備方法。
        1. 定義
        PBS緩沖液也叫磷酸緩沖鹽水。它是一種可溶性的緩沖液,由磷酸鹽緩沖液、NaCl和KCl等組成。PBS緩沖液常常用于生物學(xué)、免疫學(xué)等領(lǐng)域中進行細(xì)胞培養(yǎng)、免疫組化、免疫沉淀和印跡等操作,也被用于酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)、酶聯(lián)免疫化學(xué)發(fā)光分析(ECLIA)等生物醫(yī)學(xué)實驗技術(shù)中。
        2. 成分
        PBS緩沖液的成分包括:磷酸鹽緩沖液、NaCl和KCl。磷酸鹽緩沖液是由三種不同的磷酸根(NaH2PO4、Na2HPO4、Na3PO4)混合而成的緩沖液。NaCl和KCl是常用的鹽類,它們可以用于調(diào)節(jié)緩沖液的離子強度和滲透壓,維持生物試樣在理想的操作環(huán)境中。
        3. 用途
        PBS緩沖液可以用于以下的實驗操作:
        (1)細(xì)胞培養(yǎng)和組織培養(yǎng):PBS的成分可以使細(xì)胞在理想的狀態(tài)下存活和生長,它可以用于細(xì)胞培養(yǎng)中的沖洗、淋洗和組織切片的染色。
       ?。?)蛋白質(zhì)免疫沉淀:免疫學(xué)實驗中經(jīng)常需要用到PBS緩沖液作為樣品洗滌液。
       ?。?)蛋白質(zhì)印跡:PBS緩沖液可以用于印跡膜洗滌,從而幫助減少非特異性背景信號。
        (4)酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA):ELISA中常常需要使用PBS緩沖液沖洗微孔板和稀釋樣品。
        4. 制備方法
        PBS緩沖液的制備方法如下:
       ?。?)準(zhǔn)備1000 ml蒸餾水,將其倒入三口寬口燒瓶中,加熱至80°C。
       ?。?)向燒瓶中加入10.0 g NaCl和0.2 g KCl,使溶液充分?jǐn)嚢杈鶆颉?/span>
       ?。?)將6.8 g Na2HPO4·7H2O和2.4 g NaH2PO4·H2O加入燒瓶中,充分?jǐn)嚢杈鶆颉?/span>
       ?。?)調(diào)節(jié)PBS的pH值為7.4,使用磷酸鹽緩沖液或鹽酸/氫氧化鈉溶液來完成pH的調(diào)節(jié),直到穩(wěn)定在7.4。
       ?。?)根據(jù)實際需要,將PBS緩沖液調(diào)節(jié)為所需的體積和濃度。
        總之,PBS緩沖液是一種非常重要的實驗用緩沖液,它可以幫助維持實驗中的PH值、離子強度和溫度等參數(shù),保證實驗的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。在進行生物醫(yī)學(xué)和生物學(xué)實驗研究時,PBS緩沖液不可少,它不僅可以保證實驗的成功,還可以為科學(xué)家發(fā)現(xiàn)新的生物學(xué)知識奠定基礎(chǔ)。
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