PBS緩沖液(Phosphate Buffered Saline)是一種常見的生化實(shí)驗(yàn)室緩沖液,廣泛應(yīng)用于細(xì)胞培養(yǎng)、免疫組織化學(xué)、免疫熒光染色、流式細(xì)胞術(shù)等領(lǐng)域。 1. 配制方法:
PBS緩沖液的基礎(chǔ)成分包括磷酸鹽、氯化物和納米級(jí)水。以下是一種常用的配制方法:
- 取1升去離子水(DI水),加入8克NaCl(氯化鈉)、0.2克KCl、1.44克Na2HPO4(磷酸二氫鈉)和0.24克KH2PO4(磷酸氫二鉀)。
- 溶解以上成分,并用去離子水調(diào)整pH值至7.4。
- 過(guò)濾溶液以去除雜質(zhì),并用無(wú)菌技術(shù)儲(chǔ)存。
2. 優(yōu)勢(shì)與應(yīng)用:
- 細(xì)胞培養(yǎng):緩沖液在細(xì)胞培養(yǎng)中可用于洗滌細(xì)胞、稀釋培養(yǎng)基和懸浮細(xì)胞。由于其溫和的離子濃度和pH值,不會(huì)對(duì)細(xì)胞造成傷害。
- 免疫組織化學(xué):緩沖液可用于固定、洗滌和稀釋組織樣本,以提供穩(wěn)定的環(huán)境,保持抗原的完整性,并降低非特異性背景信號(hào)。
- 免疫熒光染色:緩沖液可用于洗滌和稀釋熒光標(biāo)記的抗體,幫助清除未結(jié)合的抗體,并提供適當(dāng)?shù)木彌_環(huán)境,使熒光染色結(jié)果更準(zhǔn)確。
- 流式細(xì)胞術(shù):緩沖液可用作樣本洗滌緩沖液,以去除細(xì)胞培養(yǎng)基中的血清蛋白、細(xì)胞碎片和細(xì)胞器,防止堵塞儀器和影響分析結(jié)果。
PBS緩沖液是一種重要的實(shí)驗(yàn)室工具,在生命科學(xué)研究領(lǐng)域中有廣泛應(yīng)用。通過(guò)了解PBS緩沖液的配制方法和優(yōu)勢(shì),我們可以更好地利用它在實(shí)驗(yàn)中的作用,提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。