MEM培養(yǎng)基是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中的常用的培養(yǎng)基，主要是貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)，修改配方后也可用于其他類(lèi)型細(xì)胞培養(yǎng)，例如如無(wú)鈣(Ca)MEM培養(yǎng)基可被用于懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)，而MEM培養(yǎng)基可被用于二倍體細(xì)胞的培養(yǎng)。
配方
1.配置前準(zhǔn)備：配置培養(yǎng)基新制備的milli water。調(diào)節(jié)pH值的酸堿溶液也應(yīng)該使用這種水配置。制備培養(yǎng)基的器皿清洗干凈，并用milli water潤(rùn)洗兩次。
2.溶解培養(yǎng)基：取5%終體積的milli water，加入到1L玻璃杯中，將干粉培養(yǎng)基倒入燒杯，水洗包裝袋內(nèi)面兩次，倒入培養(yǎng)液中。磁力攪拌助溶。
3.補(bǔ)加試劑：根據(jù)包裝袋說(shuō)明加入NaHCO3(2.2g)，HEPES(2.383,10mmol)、非必需氨基酸(可不加，10ml)。
4.加抗生素：一般抗生素終濃度--青霉素100U/ml，鏈霉素100U/ml。1L加入10m儲(chǔ)備液。
5.調(diào)pH值：加水到1000ml，然后用HCL或者NaOH調(diào)節(jié)pH到7.2。
6.過(guò)濾除菌：采用0.22um濾膜。過(guò)濾后分裝于小瓶中(100或200ml)。過(guò)濾后pH值一般上升0.1-0.3。
7.加小牛血清：根據(jù)MEM培養(yǎng)基配置的量將小牛血清分裝，冷凍保存(-20度)。臨用前將加入小牛血清10%。
使用說(shuō)明
1、保存在2-8度干燥環(huán)境，避光。
2、稱(chēng)量出比終容積小5%的蒸餾水，混合的容器盡可能接近終容積。
3、將干粉加入到室溫15到30度的水中，輕柔攪拌，勿用熱水。
4、沖洗出包裝袋內(nèi)所有干粉。
5、每升培養(yǎng)基加入2.2g碳酸氫鈉。
6、用水稀釋至終的容積，攪拌直至溶解。不要過(guò)分混合。
7、調(diào)整pH值比后的培養(yǎng)用的pH值要低0.2到0.3(過(guò)濾后pH值一般要升高0.1 到0.3)：用1N NaOH 和 1N HCl，邊攪拌邊緩慢添加。調(diào)整pH值完畢后，封閉容器，直至過(guò)濾。
8、立即用膜濾過(guò)消毒。
