DMEM高糖培養(yǎng)基是一種應(yīng)用十分廣泛的培養(yǎng)基,可用于許多哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng),更適合高密度懸浮細(xì)胞培養(yǎng)。適用于附著性較差,但又不希望它脫離原來生長點的克隆培養(yǎng),也可用于雜交瘤中骨髓瘤細(xì)胞和DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細(xì)胞的培養(yǎng)。 DMEM高糖培養(yǎng)基配制方法如下:
1.制備新鮮三蒸水或Millipore超純水。
2.稱取所需量的干粉培養(yǎng)基,加入約終體積一半的三蒸水中;若配制一個包裝的培養(yǎng)液,在將整個包裝的干粉倒入三蒸水后,需用水洗包裝袋內(nèi)面2次,倒入培養(yǎng)液中,以保證所有干粉都溶解成培養(yǎng)液。磁力攪拌或人工攪拌使之*溶解。
3.根據(jù)包裝袋上的要求補加所需量的碳酸氫鈉;根據(jù)實驗需要,添HEPES、谷氨酰胺和其他特殊物質(zhì)。
4.加水定容到終體積。
5.必要時用1mol/L鹽酸和1mol/L氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH。
6.用無菌0.22um濾膜過濾除菌,分裝于無菌血清瓶中,4℃冰箱保存。
DMEM高糖培養(yǎng)基注意事項:
1、使用產(chǎn)品時應(yīng)注意無菌操作,避免污染。
2、本產(chǎn)品含有血清和雙抗,如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗,可以直接使用。
3、為保持本產(chǎn)品的最佳使用效果,不宜將其長時間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4、所有產(chǎn)品請于保質(zhì)期內(nèi)使用,超出保質(zhì)期,必須放棄使用。
5、本產(chǎn)品只供進一步科研使用,不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
DMEM高糖培養(yǎng)基應(yīng)用:
*原用于鼠胚胎細(xì)胞的培養(yǎng);
*支持絕大多數(shù)細(xì)胞系的生長;
*支持肝細(xì)胞(老鼠),內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng);
*一般建議使用10%FBS培養(yǎng)細(xì)胞。