胎牛血清是通過母牛剖腹產(chǎn)胎牛心臟密閉穿刺采血獲得的新鮮胎牛全血,經(jīng)自然層析、離心后收集得到去除血細胞、纖維蛋白等成分的淡黃色透明上清液體,后經(jīng)生產(chǎn)使用多級高置流膜過濾技術(shù)和三級0.1?m終端微濾方法處理后,常用于細胞培養(yǎng)相關(guān)實驗。
胎牛血清是細胞培養(yǎng)中常用的天然培養(yǎng)基,因為胎牛未進食過母乳,所以IgG含量低,且含有豐富的細胞生長必須的營養(yǎng)成份,故目前多數(shù)實驗人員選擇的都是胎牛血清進行動物細胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。
1.提供對維持細胞指數(shù)生長的激素,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。
2. 提供結(jié)合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。
3. 有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到解毒作用。
4. 是細胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源。
5. 起酸堿度緩沖液作用。
6. 提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。
非正規(guī)胎牛血清的產(chǎn)品會存在很多的問題:
1)疫區(qū)來源,無合格質(zhì)檢使胎牛血清存在生物學(xué)污染:支原體、噬菌體、病毒、原蟲等,會直接影響實驗的結(jié)果和穩(wěn)定。
2)采血工藝不規(guī)范,導(dǎo)致采集的原血放置時間過長或操作不當導(dǎo)致溶血,血液中血細胞裂解,胎牛血清顏色呈紅色或暗紅色,這樣的血清含有許多胞內(nèi)產(chǎn)物,里面很多物質(zhì)都會對細胞有刺激作用,影響實驗的穩(wěn)定性和數(shù)據(jù)的真實性。
3)血清批次不穩(wěn)定,添加來補?
很多不法商販拿到低廉的疫區(qū)原料血清進行加工生產(chǎn),為了保障血清的培養(yǎng)效果會對血清進行處理,較常見的是添加激素、轉(zhuǎn)鐵蛋白、BSA、生長因子等,還有的會和新生牛血清、培養(yǎng)基等勾兌,更有甚者用的根本就不是牛血清,此類操作對所有生物學(xué)實驗都有巨大的影響。
不管是國外還是國內(nèi)血清生產(chǎn)標準都要求不得添加任何外源成分,以前某品牌就有前車之鑒,他們在血清中加入大量細胞因子和生長因子,導(dǎo)致細胞瘋長,但是做細胞功能性實驗,結(jié)果卻慘不忍睹。目前該品牌已經(jīng)被取締,但這種情況在非正規(guī)渠道胎牛血清身上屢禁不止。